細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代骨髓肥大細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代骨髓肥大細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代骨髓肥大細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于大鼠原代骨髓肥大細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28 0.5mgMrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)

EPDR1 Protein Human 重組人 EPDR1 蛋白

FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 Protein

TF Protein Mouse 重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 Protein

大鼠肝素(HS)試劑盒 ，英文名： HS ELISA Kit

Mouse islet cell aibody (ICA) ELISA Kit 小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)試劑盒

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforG-CSFELISAKit大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子

細(xì)胞谷草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性光譜法定量試劑盒20次

Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠脫氫酶E1(PDHE1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Salmonella typhi aigen (St-Ag) ELISA Kit 人傷寒抗原(St-Ag)試劑盒

Humanlatemembraneprotein-1,LMP-1ELISAKit 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-glycoproteinaibody,GP試劑盒人抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

HumanvisfatinELISAKit人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FAT4單克隆抗體

APC標(biāo)記人CD278 (ICOS)單克隆抗體

大鼠原代骨髓肥大細(xì)胞專用培養(yǎng)基FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 Protein

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28 0.5mgMrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)

BLMH重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 Protein

EPDR1 Protein Human 重組人 EPDR1 蛋白

TF Protein Mouse 重組小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。