293T/17 (胚腎細(xì)胞)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
293T/17 (胚腎細(xì)胞) 的相關(guān)*：細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
ERK蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
ERK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
ERK蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-26

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：415

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章

人20S蛋白酶體ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)留心什么

人20S蛋白酶體ELISA檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)

ELISA試劑盒查驗(yàn)辦法的局限性與安全提示

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X0465
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
293T/17 (胚腎細(xì)胞)	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0465

商品介紹：

名稱 293T/17 (胚腎細(xì)胞)

別稱HEK 293T/17; 293T/17

種屬人類

年齡（性別）胎兒

組織來(lái)源腎

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述293T/17細(xì)胞株是293T細(xì)胞株的衍生株，293T是293 [HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細(xì)胞進(jìn)行克隆，檢測(cè)pBND和pZAP載體，得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T/17細(xì)胞。293T/17細(xì)胞持續(xù)表達(dá)猿病毒40(SV40)大T抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號(hào)克隆。293T/17細(xì)胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到ANJOU65細(xì)胞株，ANJOU65細(xì)胞再用pCRIPgag-2和pGPT2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達(dá)細(xì)胞株BOSC 23。ANJOU65細(xì)胞用攜帶gpt抗性基因的pCRIPAMgag載體轉(zhuǎn)染得到Bing雙向性表達(dá)包裝細(xì)胞株。

生物安全等級(jí)2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

注意事項(xiàng)該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正常現(xiàn)象，請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

ADAP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

B3GALT4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

PEX14 基因全長(zhǎng)ORF克隆

AGPAT3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

FBLIM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

HSD3B2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

ACOT7 基因全長(zhǎng)ORF克隆

OPRL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

DRG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

ACTL8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

293T/17 (胚腎細(xì)胞) 100mL Tricine Buffer,0.5M pH6.5 Tricine Buffer,0.5M pH6.5 常溫保存

30µL HRP標(biāo)記內(nèi)參抗體（GAPDH）

250mL Sodium Borate Buffer（硼酸鈉緩沖液）,0.5M,pH8.0 Sodium Borate Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存

100g RNPVP K30 (聚乙烯咯烷酮K30) 常溫

2 ug pEBFP-N1 pEBFP-N1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

CDC厭氧菌瓊脂 CDC Anaerobic Agar 250g

25g 葡聚糖凝膠 LH-20 Sephadex LH-20 室溫保存

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